接下來咱們就共同嘮嘮基因工程的第二步。
上回咱們說完了基因工程的第一步，就是目的基因的獲取。接下來咱們就嘮嘮基因工程的第二步，基因表達(dá)體的構(gòu)建。這一部是基因工程的核心，也是基因工程的第二步。
對(duì)于基因表達(dá)體的構(gòu)建，我們的目的有兩個(gè)：
1使目的基因在受體中穩(wěn)定存在
2使目的基因可以遺傳給下一代
這就是基因表達(dá)體的構(gòu)建的目的。
之后，既然談到了基因表達(dá)載體，那么咱們就來看看基因表達(dá)體是由什么組成的。
基因表達(dá)載體是通過啟動(dòng)子+目的基因+標(biāo)記基因+終止子組成的。
啟動(dòng)子的實(shí)質(zhì)就是我們前面說的引物，他的目的就是被RNA聚合酶識(shí)別，這樣就可以在生物體內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程了。從而產(chǎn)生我們所需要的蛋白質(zhì)，或者是相對(duì)的性狀。
目的基因?qū)嵸|(zhì)就是我們需要表達(dá)的基因，也就是這個(gè)基因表達(dá)載體的主體成分。
標(biāo)記基因就是為了我們后續(xù)的鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因的一種相當(dāng)于熒光標(biāo)記，可以及時(shí)的讓我們發(fā)現(xiàn)目的基因的存在。
終止子，顧名思義，它的目的就是讓轉(zhuǎn)錄進(jìn)行停止，實(shí)質(zhì)就是終止密碼子。
這就是基因工程的第二步操作，基因表達(dá)載體的構(gòu)建。
之后咱們就進(jìn)入基因工程的第三步過程，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞中。
在此之前，我們要提出一個(gè)概念，叫做轉(zhuǎn)化。在基因工程中，我們的特有名詞轉(zhuǎn)化指的是目的基因進(jìn)受體細(xì)胞，并在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在與表達(dá)的過程，這個(gè)過程就叫做轉(zhuǎn)化。
那么我們的轉(zhuǎn)化方法有什么呢？正可謂是：物以類聚，人以類分。
所以我們要根據(jù)生物種類的不同而采用不同的轉(zhuǎn)化方法。
對(duì)于動(dòng)物而言，我們需要采用顯微注射技術(shù)。
什么是顯微注射技術(shù)呢？所謂顯微注射技術(shù)，就是指在顯微鏡下，通過人工方法向動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行注射我們的目的基因，也就是基因表達(dá)載體。
在這里我們需要使用現(xiàn)代的儀器，顯微注射儀將目的基因注入到細(xì)胞中，并且還需要將細(xì)胞置于子宮內(nèi)培養(yǎng)，否則它難以形成鮮活的個(gè)體。
對(duì)于微生物而言，我們通常采用鈣離子處理法。
鈣離子處理法就是利用了微生物對(duì)鈣離子吸收這一過程的現(xiàn)象，而采用的一種技術(shù)方法。
這種技術(shù)方法就是用鈣離子處理細(xì)胞，讓細(xì)胞可向細(xì)胞內(nèi)吸收鈣離子的狀態(tài)。
這種狀態(tài)也叫感受態(tài)，這種細(xì)胞就叫做感受態(tài)細(xì)胞。之后我們?cè)傧蜻@個(gè)溶液中注入DNA分子，讓其吸收。
買二贈(zèng)一，既然說完了基因工程的第二步和第三步操作，那么我們順便來談一談基因工程的最后一步。
基因工程的最后一步也是進(jìn)工程的第四步（小編比較細(xì)心，害怕漢字不認(rèn)識(shí)>_<￤￤￤，其實(shí)是按照，特定的敘述方式進(jìn)行敘述的，請(qǐng)多多見諒?。?p> 基因工程的第四步是：目的基因基因的檢測(cè)與鑒定。這一步也是很重要的一步，也是非常不可或缺的。
因?yàn)樗梢詸z查基因工程是否成功，如果成功，需要記錄數(shù)據(jù)，如果不成功，還需要重新做實(shí)驗(yàn)，所以這一步，必不可少。
對(duì)于目的基因的檢測(cè)與鑒定的方法有：DNA分子雜交技術(shù)、分子雜交技術(shù)、抗原―抗體雜交技術(shù)、個(gè)體生物學(xué)水平鑒定如接種實(shí)驗(yàn)等。
在這里，這些雜交技術(shù)都是需要進(jìn)行的，并且是按照這個(gè)順序從上至下依次進(jìn)行的。每一個(gè)技術(shù)都是不能缺少的，這是逐步檢測(cè)DNA是否復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯、表達(dá)的流程。
DNA分子雜交技術(shù)就是將含目的基因的DNA片段，用同位素標(biāo)記作為探針，讓探針和基因組DNA雜交，如果有雜交帶，那么就有目的基因進(jìn)入染色體當(dāng)中。反之，則沒有。沒有，就需要重新做實(shí)驗(yàn)。
分子雜交技術(shù)是指檢測(cè)mRNA是否存在目的基因的遺傳片段。具體的操作是：在生物體內(nèi)提取mRNA用已經(jīng)標(biāo)記的目的基因，作為探針與mRNA雜交，如果出現(xiàn)雜交帶，那么說明有此類mRNA產(chǎn)生。反之，和上述一樣。所以就不多說了。
抗原―抗體雜交技術(shù)是從受體的生物體中提取蛋白質(zhì)與相應(yīng)的抗體結(jié)合，如果出現(xiàn)雜交代，那么就會(huì)有蛋白質(zhì)產(chǎn)品的生成。反之，一樣。
對(duì)于個(gè)體生物學(xué)水平鑒定，我們就簡(jiǎn)單的了解最基礎(chǔ)的接種實(shí)驗(yàn)。
接種實(shí)驗(yàn)就是指將生物學(xué)與天然生物對(duì)比，對(duì)其接種改變的性狀，觀察看看是否此類性狀。這就是接種實(shí)驗(yàn)。
好了，話不多說了，這就是今天的全部?jī)?nèi)容，買二贈(zèng)一，你怎么看？⊙ω⊙
采曉天
其實(shí)沒有什么想說的，單純就是冒個(gè)泡*＾◎＾*