第三十章 磕磕絆絆地起步

　　林蕭然輕輕搖頭，他已經(jīng)打定主意，以后再與師姐打交道，雖可以繼續(xù)刺激對(duì)方，撩撥火氣，卻要更加慎重，像這種給自己帶來無限麻煩的事情，萬萬不能重現(xiàn)！

　　這一次他確實(shí)爽了，也獲得了自尊心點(diǎn)，可是收拾爛攤子也著實(shí)頭痛，好像是以本傷人，最后弄得一地雞毛。

　　林蕭然細(xì)胞培養(yǎng)的見識(shí)遠(yuǎn)超黃薇，盡管對(duì)方看似存在刁難的意思，他也不會(huì)真正感到為難，只是稍一思慮，就想到應(yīng)對(duì)之策。

　　“我們目前擁有的是原發(fā)細(xì)胞，培養(yǎng)方案亟待探索，卻不一定要設(shè)定單一目標(biāo)，可以同時(shí)引入細(xì)胞膜物質(zhì)運(yùn)輸加以研究，如此一來，將大幅度提高實(shí)驗(yàn)效率，你以為如何？”

　　黃薇聽罷，眼前微露光芒，口中喃喃，“課題是細(xì)胞懸浮馴化及貼壁和懸浮狀態(tài)膜運(yùn)輸研究，原發(fā)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，已經(jīng)可以著手研究貼壁狀態(tài)細(xì)胞膜運(yùn)輸特性，待實(shí)現(xiàn)細(xì)胞懸浮馴化，再完成余下實(shí)驗(yàn)，可是，細(xì)胞培養(yǎng)條件尚未優(yōu)化，火急火燎進(jìn)行這一步，有意義嗎？”

　　“影響肯定存在，但沒有多么嚴(yán)重，最終取得的數(shù)據(jù)仍在許可范圍之內(nèi)，那點(diǎn)影響完全可以忽略！”

　　有關(guān)細(xì)胞的膜運(yùn)輸，乍聽起來很高大上，弄清原理就會(huì)發(fā)現(xiàn)沒有多么玄奧，簡(jiǎn)單說來，膜運(yùn)輸是指將細(xì)胞外界物質(zhì)輸送至細(xì)胞內(nèi)，或細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)排出細(xì)胞的過程！

　　細(xì)胞膜控制著一切物質(zhì)的進(jìn)出，比如細(xì)胞生長(zhǎng)所須的養(yǎng)料，要經(jīng)由細(xì)胞膜進(jìn)入胞內(nèi)，代謝終產(chǎn)物同樣需要經(jīng)細(xì)胞膜排至胞外，細(xì)胞膜是細(xì)胞最關(guān)鍵的屏障與門戶。

　　細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)非常簡(jiǎn)單，由兩層磷脂分子構(gòu)成，中間嵌有特定蛋白，它非常薄，僅七納米左右，與高端芯片電路仿佛！

　　細(xì)胞膜如何控制物質(zhì)進(jìn)出呢？

　　通常情況下，絕大多數(shù)小分子，比如水、多數(shù)離子、氨基酸及維生素，可以按照細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境的濃度差，自由擴(kuò)散穿過細(xì)胞膜，而鉀、鈉、鈣等重要離子及大分子，如蛋白，要通過主動(dòng)運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞。

　　很好理解，比如生活在大海中的魚，海水雖然很咸，魚肉含鹽量卻并不高，這就是細(xì)胞膜的功勞，限制了鹽的隨意滲入，可以說沒有細(xì)胞膜，大海將不可能存在生物。

　　我們一般認(rèn)為，貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，膜運(yùn)輸?shù)哪芰θ跤趹腋∨囵B(yǎng)，而初始細(xì)胞均以貼壁形式生長(zhǎng)，這也是為什么在細(xì)胞培養(yǎng)中，要進(jìn)行細(xì)胞的懸浮馴化，目的在于提升膜運(yùn)輸效率。

　　“唉，提起膜運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)，我的心里就是一陣煩悶，仔細(xì)想想，又覺得你說得沒錯(cuò)，這兩天看了一些相關(guān)資料，雖然還沒有仔細(xì)研究，但明白無論工作量還是實(shí)驗(yàn)難度，提升了不止一個(gè)級(jí)別，以后有得苦吃嘍！”

　　“也不用特別擔(dān)心，因?yàn)樵S多實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性很強(qiáng)，只要熟練之后，就會(huì)發(fā)現(xiàn)并不是想象中那么困難，同時(shí)，我們也要有自知之明，清楚自己的定位，研究要有選擇性，論文有說服力就好，不必追求完美，不必貪多……，否則容易撐著！”林蕭然微笑道。

　　“有選擇性？”黃薇微微思索，隨后拉開抽屜取出一摞文本，都是些沒有整理的初始文獻(xiàn)，“這是些有關(guān)維生素、氨基酸、葡萄糖和蛋白等，膜運(yùn)輸方面的文獻(xiàn)，你覺得怎樣取舍？”

　　“有機(jī)的，無論小分子還是大分子，實(shí)驗(yàn)室沒那個(gè)條件，舍了吧，只做溶解氧與鉀離子好了！”林蕭然早有決斷，選出兩項(xiàng)最容易實(shí)現(xiàn)的研究對(duì)象！

　　可供研究膜運(yùn)輸效率的對(duì)象很多，無論自由擴(kuò)散方式，比如水、氧氣等，或者主動(dòng)運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞的物質(zhì)，如鉀、鈉、鈣及蛋白等，都可供選擇，不可否認(rèn)，研究對(duì)象越多，實(shí)驗(yàn)結(jié)果就越有說服力。

　　那么，是否應(yīng)將更多因素納入研究對(duì)象？

　　這么想當(dāng)然沒有問題，只可惜，條件所限，即使愿望很美好，也必須慎之又慎，原因很簡(jiǎn)單，人力物力消耗不起！

　　選擇溶解氧監(jiān)測(cè)是因?yàn)楸容^容易實(shí)現(xiàn)，細(xì)胞培養(yǎng)中，利用氧電極可以輕松獲得溶解氧數(shù)據(jù)，再以時(shí)間為X軸溶解氧為Y軸，很容易繪制溶解氧曲線，得出結(jié)論。

　　但溶解氧數(shù)據(jù)相對(duì)粗放，參考性較差，很難得出我們需要的結(jié)論，只能作為輔助參考數(shù)據(jù)，與之相比，我們更關(guān)心主動(dòng)運(yùn)輸數(shù)據(jù)，如鉀、鈉、鈣等離子的遷移，實(shí)驗(yàn)中，可以預(yù)設(shè)培養(yǎng)基特定離子濃度，接下來按時(shí)檢測(cè)，可以得到相應(yīng)數(shù)據(jù)。

　　鉀、鈉、鈣等離子的檢測(cè)同樣繁瑣，大家都知道，鉀、鈉屬于堿金屬，它們不容易形成沉淀，需要通過特殊的方法檢驗(yàn)，具體過程不再贅述，總之相當(dāng)繁瑣。

　　而鈣離子雖然容易沉淀，但它也容易絡(luò)合，檢測(cè)時(shí)，很難判定哪部分沉淀，哪部分轉(zhuǎn)化成為絡(luò)合物，同樣不易獲得有效檢測(cè)結(jié)果，不是很好的研究對(duì)象，沒有能力的情況下只能放棄。

　　生物反應(yīng)的重現(xiàn)性比較差，加之實(shí)驗(yàn)條件簡(jiǎn)陋，每一項(xiàng)數(shù)據(jù)會(huì)呈現(xiàn)較大的發(fā)散性，若選取研究對(duì)象太多，黃薇很難在畢業(yè)前得出有效結(jié)論，最現(xiàn)實(shí)的做法是盡可能精簡(jiǎn)實(shí)驗(yàn)，如此一來，論文雖然不是多么好看，最起碼不會(huì)影響畢業(yè)。

　　黃薇的性格是很傲氣的，加之也翻閱了一些資料，有了一定見識(shí)，可是以她那點(diǎn)可憐的知識(shí)儲(chǔ)備，在小師弟林蕭然面前，依然無法提出多少反對(duì)意見，多數(shù)時(shí)候都在木然點(diǎn)頭。

　　做通了黃薇的工作，接下來的事情就簡(jiǎn)單了，他們很快進(jìn)入實(shí)驗(yàn)討論環(huán)節(jié)，也算不上討論，因?yàn)槎鄶?shù)情況下都是林蕭然在說，黃薇在聽。

　　細(xì)胞實(shí)驗(yàn)說起來簡(jiǎn)單，真正準(zhǔn)備起來也相當(dāng)繁瑣，簡(jiǎn)而言之，實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作可以分為兩部分。

　　其一是材料，關(guān)鍵是細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)到手，但試劑、設(shè)備等也不容忽視，任何一項(xiàng)出現(xiàn)紕漏，都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的進(jìn)展。

　　試劑也不是那么簡(jiǎn)單，比如培養(yǎng)基，細(xì)胞培養(yǎng)基與微生物培養(yǎng)基存在著顯著的差異，配方之類不提，單純滅菌過程就完全不同。

　　微生物的滅菌，通常采用高壓滅菌鍋，121℃、15分鐘即可，非常簡(jiǎn)單，但細(xì)胞培養(yǎng)基就比較麻煩，只因許多成分不耐高溫，只能采取過濾方法隔離雜菌。

　　細(xì)胞培養(yǎng)基的準(zhǔn)備，過濾同樣至關(guān)重要！

　　另外，細(xì)胞培養(yǎng)所需的條件也有別于微生物培養(yǎng)，它需要使用二氧化碳培養(yǎng)箱，而二氧化碳要提前到器材科領(lǐng)取！

　　細(xì)胞培養(yǎng)基所需的牛血清和各種維生素等，器材科肯定沒有，不急的話可以在器材科報(bào)備，等它采購，但是器材科的辦事效率低到讓你懷疑人生，好吧，最好自己聯(lián)系商家直接購買！

　　檢測(cè)同樣需要大量試劑，都需要準(zhǔn)備妥當(dāng)，否則實(shí)驗(yàn)開始了，卻又發(fā)現(xiàn)短缺某些試劑，到時(shí)候只有哭的份兒了，無法檢測(cè)，就意味著實(shí)驗(yàn)白做！

　　實(shí)驗(yàn)方法同樣關(guān)鍵，實(shí)驗(yàn)方法也是對(duì)實(shí)驗(yàn)過程的描述，它的存在不僅可以規(guī)范實(shí)驗(yàn)，還可以在一定范圍內(nèi)發(fā)現(xiàn)其中疏漏，實(shí)驗(yàn)步驟描述得越詳實(shí)，出現(xiàn)疏漏的機(jī)率就越低。

　　材料方面此時(shí)肯定無法處理，兩人開始起草實(shí)驗(yàn)方法，起草工作由黃薇一人承擔(dān)，這也是林蕭然特別強(qiáng)調(diào)的，實(shí)驗(yàn)是她的實(shí)驗(yàn)，從頭到尾應(yīng)該由她一人完成！

　　林蕭然也沒閑著，他趁此功夫打開電腦，開始按照腦海中的記憶，查詢起生物試劑供應(yīng)商的聯(lián)絡(luò)方式。

　　他在美津供職八年，在試劑小組工作，對(duì)于市場(chǎng)主流生物制劑供應(yīng)商非常熟悉，查找起來相當(dāng)輕松。

　　不多時(shí)，一家家比較靠譜的試劑供應(yīng)商，出現(xiàn)在屏幕，林蕭然擇重點(diǎn)記了下來。

　　也許黃薇發(fā)現(xiàn)小師弟太好用了，用起來沒有一點(diǎn)心理負(fù)擔(dān)，因此，問題一個(gè)接著一個(gè)！

　　“蕭然，過濾好像需要?dú)獗?，我們?shí)驗(yàn)室沒有啊，其他教研室倒是有，但設(shè)備太大，不方便借來吧！”黃薇望看向林蕭然，茫然問道。

　　“用不上氣泵，水抽子就行，那玩藝兒足夠用！”林蕭然側(cè)過頭，答道。

　　“蕭然，我們要用三角瓶嗎？可是我們沒有二氧化碳搖床，溶解氧怎么解決？”

　　“知道我們沒有二氧化碳搖床，就不搖了唄，用二氧化碳培養(yǎng)箱將就一下，溶解氧低的問題……，直接用平皿培養(yǎng)吧，增養(yǎng)基液較淺，有利于氧交換，同時(shí)還可以節(jié)省培養(yǎng)基，那東西挺貴的，省得陸老板心疼?！?p>　　“在平皿里面……，放液體培養(yǎng)基？沒有這樣做過啊，感覺挺新鮮，能行嗎？”

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　　“蕭然，查資料的時(shí)候發(fā)現(xiàn)，有些培養(yǎng)基配方用到牛血清，有些卻沒有，為什么??？”

　　“在申請(qǐng)臨床批文階段，細(xì)胞基因重組表達(dá)抗體蛋白時(shí)，不允許培養(yǎng)基出現(xiàn)牛血清成分！”

　　“到底采用哪種配方呢？”

　　“我們只是做細(xì)胞懸浮馴化！”

　　“也就是可以使用牛血清配方？”

　　“……”林蕭然。

　　時(shí)間一分一秒過去，近兩個(gè)小時(shí)，實(shí)驗(yàn)方法尚未完全縷清，但沒關(guān)系，明天還可以繼續(xù)完善，關(guān)鍵是，黃薇終于停下了手頭工作。

　　林蕭然長(zhǎng)長(zhǎng)呼出一口氣，暗嘆，師姐不發(fā)怒的時(shí)候，同樣麻煩！